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Ribo-seq——检测正在翻译的RNA信息,连接转录组学与蛋白质组学的桥梁

2025年04月10日 15:23:53 人气: 1352 来源: 蓝景科信河北生物科技有限公司

Ribo-seq技术原理

翻译(Translation)是基因表达的关键步骤,是指信使RNA(mRNA)携带的遗传信息被核糖体解码并转化为特定氨基酸序列的过程。蛋白质翻译的调控是高度精准、多层次、动态化的过程。

在全基因组水平上,转录与翻译经常存在显著差异。通过转录组测序鉴定的上调表达基因中,只有其中20%在蛋白水平上调。

核糖体印迹测序(Ribosome profiling, Ribo-seq),能够精细解析细胞内的翻译过程。Ribo-seq的技术核心是识别与核糖体结合的RNA,以及正在被翻译的约30个核苷酸。对核糖体结合的RNA片段进行测序,能够精确记录核糖体在翻译过程中的位置。将转录组与Ribo-seq数据联合分析,可以计算量化蛋白质的合成速率。通过Ribo-seq分析,能够鉴定新型的uORF、microPeptide、发现新颖的翻译调控机制以及能够被翻译的lncRNA。

Ribo-seq已经应用于解析生长发育与分化、疾病发生机制和抗逆分子机制的研究。

应用方向

Ribo-seq应用于研究转录本的翻译活性、鉴定翻译起始位点、密码子使用、ORF位置和mRNA的翻译调控机制。

Ribo-seq技术已经广泛应用在动物、植物和微生物的研究中,用于揭示生长发育、形态建成、疾病发生、逆境胁迫响应的调控机制。总之,Ribo-seq能从基因组水平检测正在翻译的mRNA序列信息,揭示核糖体在mRNA上的位置和翻译活性,并帮助解析翻译调控机制。

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分析内容

? 标准生信分析

● 原始数据过滤与测序质量评估

● 比对去除rRNA、tRNA、sRNA等

 Reads长度分布统计与长度过滤

 比对参考基因组

 测序饱和度分析

 ORF在基因组上的分布统计与分类

 三碱基节律分析

 翻译基因统计与表达量分析

 样本关系分析

 组间差异翻译基因分析

 差异翻译基因的GO和KEGG功能富集分析

 ORF的翻译潜力分析

 ORF的特征分析


? Ribo-seq与RNA-seq的联合分析

● 翻译效率计算

● Ribo-seq与RNA-seq的相关性分析

● 翻译效率与转录水平的关联分析


结果展示

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Clean reads长度统计

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Reads在参考基因组不同区域的分布

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P-Site分析

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ORF分析

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ORF翻译潜力分析

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ORF特征鉴定

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uORF对annotated ORF的影响

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Ribo-seq与转录组数据联合分析

我们的优势

● 实验周期快、质量高、结果稳定可靠。

● 丰富的物种经验。

已做物种

人 小鼠 大鼠 猪 家蚕 果蝇 拟南芥 小麦 水稻 玉米 烟草 毛白杨 胡杨 甘薯 甲藻等





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