RNA和DNA提取实验中都有哪些问题呢？

2023年11月17日 11:07:47 人气: 439 来源: 北京百奥创新科技有限公司

核酸提取是分子生物学实验中重要的实验步骤。因为我们在分子生物学中所做的几乎所有事情在开始都需要DNA或 RNA，无论是qPCR、分子克隆、下一代测序还是其他任何东西。那么RNA和DNA提取实验中都有哪些问题呢？一起来学习一下吧！

1.产量低

如果您遇到的DNA/RNA产量低于您对样品的预期，则需要考虑许多因素。通常，这是一个裂解问题。不wan全裂解是产量低的主要原因。它也可能是由不正确的绑定条件引起的。确保使用新鲜的优质乙醇（100% 200标准）稀释缓冲液或添加到结合的步骤。劣质乙醇或旧库存可能已经吸收了水分，并且浓度不正确。如果洗涤缓冲液制备不正确，您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。

2.低纯度

如果提取的DNA被蛋白质污染（低260/280），那么您可能开始时样品过多，而蛋白质没有wan全去除或溶解。

如果DNA的260/230比率不佳，则问题通常是结合或洗涤缓冲液中的盐分。确保使用最高质量的乙醇来制备洗涤缓冲液，如果问题仍然存在，请再次洗涤色谱柱。

与其他样品相比，一些样品含有更多的抑制剂。环境样品特别容易出现纯度问题，因为腐殖质在提取过程中会被溶解。

腐殖质的行为与DNA相似，很难从硅胶柱中去除。

3.降解

降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在RNA提取过程中，样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于DNA提取，降解不是一个大问题，因为对于PCR，DNA可以被剪切并且工作正常，如果不希望有较多剪切的DNA，可以使用弱裂解的方法。

以上就是有关于RNA和DNA提取实验中都有哪些问题的解答，如果你想了解更多请咨询百奥创新客服哦~

关键词： DNA提取,RNA提取,核酸提取,基因纯化,分子生物学

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