蛋白 Pull Down（蛋白和蛋白互作）

蛋白Pull down技术将目标蛋白进行体外原核表达，使标签蛋白（Halo、GST、His等）与目标蛋白融合表达，可以不受抗体、物种限制仅借助标签的亲和介质将目标蛋白纯化出来，目标蛋白在纯化过程中可以将与其能够发生作用的蛋白“下拉”下来，进而利用蛋胶、Western Blot或者质谱鉴定拉下来的蛋白质，这些蛋白即与目标蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down实验还可以通过外源同时表达目标蛋白和待测蛋白，利用Pull down点对点的确定它们是否发生直接的相互作用，也可以仅表达蛋白质的结合区域进行蛋白Pull down，确定两个蛋白结合的结构域。

本公司主要提供Halo/GST-tag pull down：Halo-tag pull down是使用体外真核表达系统来表达目的蛋白，表达的目的蛋白携带Halo标签；GST-tag pull down是使用大肠杆菌诱导表达目的蛋白，表达的目的蛋白携带GST标签，也可以利用其它标签蛋白进行pull down实验。

Halo/FLAG-tag pull down技术优势：

真核表达系统，蛋白更接近体内结构

没有细胞内干扰因素的限制，表达成功率高

蛋白表达载体构建成功后，不需要转化和鉴定，可直接表达目的蛋白，节省时间

蛋白Pull Down结果示例

蛋白Pull Down应用案例

2023年12月，北京林业大学和蓝景科信合作，在植物学主流学术期刊Plant Stress（IF=5.0）上，发表了题为“Populus euphratica CPK21 interacts with heavy metal stress-associated proteins to mediate Cd tolerance in Arabidopsis”的研究成果。该研究借助HaloTag pull-down技术鉴定了胡杨CPK21的互作蛋白，为揭示胡杨CPK21调控植物Cd耐受的分子机制研究提供了技术支撑。