恙虫病东方体PCR试剂盒

服务流程：

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

猪泛素连接酶E3A (UBE3A)  3-磺炳十六烷二甜菜碱G蛋白偶联受体21抗体

猪CCAAT增强子结合蛋白γ(C/EBPγ) 聚氧烯月桂(Brij-35);Brij™ L23G蛋白偶联受体22抗体

猪泛素分解酶(DUB)  十二烷硫酸锂G蛋白偶联受体25抗体

猪过氧化还原酶5(PRDX5)诺纳德® P-40G蛋白偶联受体26抗体

猪核孔蛋白133kda(NUP133)硫代甜菜碱 8G蛋白偶联受体27抗体

猪中性粒碱性磷酸酶(NAP)硫代甜菜碱 10G蛋白偶联受体3抗体

猪嗜酸粒趋化因子(ECF/CCL11)硫代甜菜碱 12G蛋白偶联受体31抗体

猪脂蛋白脂酶(LPL)恩他卡朋;COMT抑制剂G蛋白偶联受体32抗体

猪质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)曲拉通X-114G蛋白偶联受体34抗体

猪核孔蛋白50kda(NUP50)曲拉通X-405G蛋白偶联受体35抗体

猪生长因子受体结合蛋白7(Grb7)异硫酸胍G蛋白偶联受体37/帕金森相关内皮素受体样受体抗体

猪血小板因子3(PF3)CHAPS;3-[3-(胆酰)二氨]-1-磺酸G蛋白偶联受体40抗体

猪集蛋白亚家族成员11(COLEC11) CHAPSO；3-[(3-胆固氨)二氨]-2-羟-1-磺酸G蛋白偶联受体43抗体

猪腺苷三磷酸结合盒转运体G1(ABCG1) 二硫赤藓(DTE)；1,4-二硫代赤藓G蛋白偶联受体44抗体

恙虫病东方体PCR试剂盒RASSF1A  Ras相关区域家族1A抗体单组份卡尔费休试剂（测酮类样 5ml，测水量较高样品

Pan-ras  Pan ras抗体单组份卡尔费休试剂（测酮类样 2ml，测水量较小样品

RCC1  染色体浓缩调控蛋白1抗体单组份卡尔费休试剂（测酮类样 1mg，测水量微小样品

Phospho-RCC1 (Ser11)  磷酸化染色体浓缩调控蛋白1抗体单组份含吡啶卡尔费休滴定剂 水/ml，测水量较高样品

Rb/RB1 protein  视网膜母瘤相关蛋白1抗体单组份含吡啶卡尔费休滴定剂 2/ml，测含水量较低样品

Phospho-Rb (Ser608)  磷酸化视网膜母瘤相关蛋白1抗体单组份含吡啶卡尔费休滴定剂 1ml，测含水量微小样品

Phospho-Rb (Ser780)  磷酸化视网膜母瘤相关蛋白1抗体单组份滴定用溶剂(不含) 水分≤0.01%，用作反应介质

Phospho-Rb (Ser807/Ser811)  磷酸化视网膜母瘤相关蛋白1抗体单组份油类测定用溶剂 水分≤0.01%，测矿物油
反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。